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Detecção sorológica de cowpea aphid-borne mosaic virus em diferentes espécies de Passiflora e caracterização biológica de um isolado obtido de Passiflora alata
(2023-04-20) Gonçalves, Marcelo Henrique Oliveira; Blawid, Rosana; http://lattes.cnpq.br/5904522485457534; http://lattes.cnpq.br/3162539756953013
As espécies pertencentes ao gênero Passiflora são popularmente conhecidas como maracujazeiros. Elas possuem importância principalmente para uso ornamental, medicinal e para comercialização de seus frutos in natura ou processado para a industrialização. Dentre as doenças que afetam o seu cultivo, as viroses possuem grande relevância. E dentre elas, a virose do endurecimento dos frutos do maracujazeiro, causada pelo cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), destaca-se em importância devido a sua grande disseminação e difícil manejo. Portanto, o objetivo principal deste trabalho foi a detecção de CABMV em diferentes espécies de Passiflora e sua caracterização biológica em plantas infectadas de Passiflora alata. Para tanto, foram coletadas 17 amostras pertencentes as espécies P. edulis, P. watsoniana, P. cincinnata, P. alata, P. rupestris, P. subrotunda, P. serrato-digitata, P. galbana, P. vesicaria e um híbrido ornamental cv. BRS Céu do Cerrado proveniente de cruzamento P. edulis x P. incarnata apresentando sintomas que poderiam ser associados a infecções virais. As amostras foram submetidas a detecção sorológica por meio de Dot-Elisa, utilizando anticorpo primário específico anti-CABMV e anticorpo secundário anti-Igg conjugado com enzima fosfatase alcalina (AS-0417, DSMZ, Alemanha). Além disso, realizou-se detecção por meio de PCR utilizando primers universais pAL1v1978 (5’ GCA TCT GCA GGC CCA CAT YGT CTT YCC NGT 3’) e Par1C496 (5’ AAT ACT GCA GGG CTT YCT RTA CAT RGG 3’) para detecção de coinfecção com begomovírus em quatro amostras de P. edulis e P. alata. O isolado RPA-1 de CABMV, obtido de P. alata, proveniente do município de Recife, foi submetido ao teste de Western blot para confirmação da presença viral. Em seguida, foi realizada a caracterização biológica do isolado RPA-1 mediante inoculação mecânica nas seguintes espécies: P. edulis, P. suberosa, P. vesicaria, Phaseoulus vulgaris cv. Preto 193, Glycine max, Vigna unguiculata cv CNC 0434, V. unguiculata cv. TVu 2331 e Nicotiana benthamiana. Dentre as amostras avaliadas, 76% testaram positivo para a detecção do CABMV, dentre elas, as espécies: P. edulis, P. alata, P. cincinnata, P. watsoniana, P. galbana, P. subrotunda e o híbrido ornamental cv. BRS Céu do Cerrado. Nenhuma amostra avaliada apresentou infecção por begomovírus. Por último, o isolado RPA-1 foi detectado por Western blot para a presença do CABMV e foi capaz de infectar plantas de N. benthamiana, P. edulis, P. vulgaris cv. Preto 193, mas não foi capaz de causar sintomas em plantas de Glycine max, Vigna unguiculata cv CNC 0434, V. unguiculata cv. TVu 2331. Apesar do isolado RPA-1 induzir sintomas virais em plantas de P. vesicaria, não foi possível detectar a presença do CABMV por sorologia, o que pode indicar que o inóculo utilizado para o experimento de inoculação mecânica pode também conter outro vírus.