Detecção de Leishmania (Viannia) braziliensis através de PCR convencional e qPCR em amostras de saliva de pacientes de região endêmica do estado de Pernambuco

Abstract

As leishmanioses são causadas por várias espécies de protozoários do gênero Leishmania, que acometem pele e/ou mucosas e vísceras. Essas doenças são caracterizadas por apresentarem diferentes manifestações clínicas e epidemiológicas. A espécie de L. (Viannia) braziliensis (a principal encontrada em Pernambuco) pode causar desde a forma cutânea - evoluindo para cura espontânea; como a forma mucosa – que pode causar lesões desfigurantes da leishmaniose tegumentar americana (LTA). Os indivíduos participantes da pesquisa foram de ambos os sexos, com idades variadas, oriundos de diversos municípios Região Metropolitana do Recife, Pernambuco, Brasil. Os pacientes foram recrutados após anamnese a partir de demanda espontânea no serviço de dermatologia do Hospital Oswaldo Cruz e foram obtidas amostras de saliva através do método de coleta não invasiva. Essas foram transportadas ao Laboratório de Imunoparasitologia do Departamento de Imunologia do Instituto Aggeu Magalhães - FIOCRUZ-PE, onde foram submetidas aos teste moleculares (PCR e qPCR). O alvo molecular utilizado foi o kDNA, Leishmania (V.) braziliensis. Além desse, foram feitos os testes convencionais utilizados para a identificação da doença (pesquisa direta e cultura). Do total de 41 amostras de fluido salivar, 26 apresentaram positividade em ambos os testes molecular para LTA. A coleta não invasiva, é um método sensível, prático e confortável ao paciente, permitindo a detecção e quantificação por PCR e qPCR do DNA de Leishmania spp. A saliva usada em técnica de diagnóstico, pode auxiliar a confirmação da LTA, visando o melhor prognóstico ao paciente.